Fenylogalaktozyd CAS:2818-58-8

Wpływ na aktywność enzymu: Fenylogalaktozyd jest powszechnie stosowany do pomiaru aktywności enzymu β-galaktozydazy. Podczas hydrolizy fenylogalaktozydu przez β-galaktozydazę uwalniany jest p-nitrofenol. Akumulację p-nitrofenolu można zmierzyć ilościowo, co pozwala na uzyskanie informacji na temat aktywności β-galaktozydazy. Efekt ten jest wykorzystywany w takich zastosowaniach, jak testy enzymatyczne i systemy przesiewowe.

Analiza ekspresji genów: Fenylogalaktozyd jest często używany jako substrat w eksperymentach biologii molekularnej do badania ekspresji genów. Gen lacZ, kodujący β-galaktozydazę, jest powszechnie łączony z sekwencjami regulatorowymi innych interesujących genów. Ekspresja genu lacZ i hydroliza fenylogalaktozydu przez β-galaktozydazę mogą wskazywać na wzór i poziom ekspresji badanego genu docelowego.

Systemy przesiewowe: Fenylogalaktozyd jest ważnym składnikiem systemów przesiewowych wykorzystujących aktywność β-galaktozydazy. Jednym z powszechnie znanych przykładów jest metoda przesiewowa niebiesko-biała, stosowana do identyfikacji komórek rekombinowanych lub transformowanych w eksperymentach biologii molekularnej. Kolonie, które z powodzeniem wchłonęły rekombinowane DNA lub przeszły rekombinację genetyczną, będą wytwarzać β-galaktozydazę, co prowadzi do hydrolizy fenylogalaktozydu i powstania niebieskiego zabarwienia.

Oczyszczanie białek: W niektórych przypadkach fenylogalaktozyd może być stosowany jako ligand w chromatografii powinowactwa, w celu oczyszczenia białek, które specyficznie wiążą się z β-galaktozydazą lub są przez nią aktywowane. Białko będące przedmiotem zainteresowania może posiadać znacznik powinowactwa lub znacznik fuzyjny zawierający domenę wiążącą β-galaktozydazę. Poprzez przepuszczenie mieszaniny białek przez kolumnę z unieruchomionym fenylogalaktozydem, pożądane białko może zostać selektywnie zatrzymane, a następnie wyeluowane.