Fenylogalaktozyd CAS:2818-58-8

Wpływ na aktywność enzymu: Fenylogalaktozyd jest powszechnie stosowany do pomiaru aktywności enzymu β-galaktozydazy.Kiedy fenylogalaktozyd jest hydrolizowany przez β-galaktozydazę, uwalnia p-nitrofenol.Nagromadzenie p-nitrofenolu można zmierzyć ilościowo, co zapewni wgląd w aktywność β-galaktozydazy.Efekt ten jest wykorzystywany w zastosowaniach takich jak testy enzymatyczne i systemy przesiewowe.

Analiza ekspresji genów: Fenylogalaktozyd jest często stosowany jako substrat w eksperymentach z zakresu biologii molekularnej w celu badania ekspresji genów.Gen lacZ, który koduje β-galaktozydazę, jest powszechnie łączony z sekwencjami regulatorowymi innych interesujących genów.Ekspresja genu lacZ i hydroliza fenylogalaktozydu przez β-galaktozydazę mogą wskazywać na wzór ekspresji i poziom badanego genu docelowego.

Systemy przesiewowe: Fenylogalaktozyd jest ważnym składnikiem systemów przesiewowych wykorzystujących aktywność β-galaktozydazy.Jednym z powszechnie znanych przykładów jest niebiesko-biała metoda przesiewowa, którą stosuje się do identyfikacji rekombinowanych lub transformowanych komórek w eksperymentach z zakresu biologii molekularnej.Kolonie, które pomyślnie pobrały rekombinowany DNA lub przeszły rekombinację genetyczną, będą wyrażać β-galaktozydazę, co prowadzi do hydrolizy fenylogalaktozydu i powstania niebieskiego zabarwienia.

Oczyszczanie białek: W niektórych przypadkach fenylogalaktozyd można zastosować jako ligand w chromatografii powinowactwa w celu oczyszczenia białek, które specyficznie wiążą się z β-galaktozydazą lub są przez nią aktywowane.Białko będące przedmiotem zainteresowania może mieć znacznik powinowactwa lub znacznik fuzyjny zawierający domenę wiążącą β-galaktozydazę.Przepuszczając mieszaninę białek przez kolumnę z unieruchomionym fenylogalaktozydem, pożądane białko można selektywnie zatrzymać, a następnie wyeluować.