IPTG CAS:367-93-1 Cena producenta
Izopropylo β-D-1-tiogalaktopiranozyd (IPTG) to syntetyczny analog laktozy, powszechnie stosowany w badaniach z zakresu biologii molekularnej i zastosowaniach biotechnologicznych.IPTG stosuje się przede wszystkim do indukowania ekspresji genów w układach bakteryjnych, gdzie służy jako molekularny wyzwalacz inicjujący transkrypcję genów docelowych.
Po dodaniu do pożywki IPTG jest wychwytywany przez bakterie i może wiązać się z białkiem represora lac, zapobiegając blokowaniu przez nie aktywności operonu lac.Operon lac to skupisko genów zaangażowanych w metabolizm laktozy, a po usunięciu białka represorowego geny ulegają ekspresji.
IPTG jest często stosowany w połączeniu ze zmutowanym promotorem lacUV5, który jest konstytutywnie aktywną wersją promotora lac.Łącząc indukcję IPTG z tym zmutowanym promotorem, badacze mogą osiągnąć wysoki poziom ekspresji genów.Pozwala to na produkcję dużych ilości białka do oczyszczania lub innych dalszych zastosowań.
Oprócz ekspresji genów, IPTG jest również często stosowane w testach przesiewowych koloru niebieskiego/białego.W tej technice gen lacZ typowo łączy się z genem będącym przedmiotem zainteresowania, a bakterie, które skutecznie wyrażają ten gen fuzyjny, będą wytwarzać aktywny enzym β-galaktozydazę.Po dodaniu IPTG wraz z substratem chromogennym, takim jak X-gal, bakterie wyrażające gen fuzyjny zmieniają kolor na niebieski ze względu na aktywność β-galaktozydazy.Pozwala to na identyfikację i selekcję rekombinowanych szczepów, które skutecznie zintegrowały dany gen.
Indukcja ekspresji genów: IPTG jest powszechnie stosowany do indukowania ekspresji docelowych genów w układach bakteryjnych.Naśladuje naturalny induktor laktozę i wiąże się z białkiem represora lac, zapobiegając blokowaniu operonu lac.Pozwala to na transkrypcję i ekspresję pożądanych genów.
Ekspresja i oczyszczanie białek: Indukcja IPTG jest często stosowana do wytwarzania dużych ilości rekombinowanych białek do różnych celów, takich jak badania biochemiczne, produkcja terapeutyczna lub analiza strukturalna.Stosując odpowiednie wektory ekspresyjne i indukcję IPTG, badacze mogą osiągnąć wysoki poziom produkcji docelowego białka u gospodarzy bakteryjnych.
Badanie przesiewowe na niebiesko/biało: IPTG jest często stosowane w połączeniu z genem lacZ i substratem chromogennym, takim jak X-gal, do testów przesiewowych na niebiesko/biało.Gen lacZ jest zazwyczaj poddany fuzji z genem będącym przedmiotem zainteresowania, a bakterie, które skutecznie wyrażają ten gen fuzyjny, będą wytwarzać aktywny enzym β-galaktozydazę.Po dodaniu IPTG i substratu chromogennego rekombinowane szczepy wyrażające gen fuzyjny zmieniają kolor na niebieski, co pozwala na łatwą identyfikację i selekcję.
Badanie regulacji genów: Indukcja IPTG jest powszechnie stosowana w badaniach do badania regulacji genów i operonów, zwłaszcza operonu lac.Manipulując stężeniami IPTG i monitorując ekspresję składników operonu lac, badacze mogą badać mechanizmy regulacji genów oraz rolę różnych czynników lub mutacji.
Systemy ekspresji genów: IPTG jest kluczowym składnikiem kilku systemów ekspresji genów, takich jak systemy oparte na promotorze T7.W tych systemach promotor lac jest często używany do kierowania ekspresją polimerazy RNA T7, która z kolei transkrybuje docelowe geny pod kontrolą sekwencji promotora T7.IPTG służy do indukowania ekspresji polimerazy RNA T7, co prowadzi do aktywacji ekspresji docelowego genu.
Kompozycja | C9H18O5S |
Analiza | 99% |
Wygląd | biały proszek |
Nr CAS | 367-93-1 |
Uszczelka | Mały i masywny |
Okres przydatności do spożycia | 2 lata |
Składowanie | Przechowywać w chłodnym i suchym miejscu |
Orzecznictwo | ISO. |